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1.本产品仅用于科学研究用，不得用于临床诊断或治疗等。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

一年

酶标仪

细胞/组织

1.使用便捷；
2.检测灵敏度高，线性范围宽。

酶标仪

1.酶标仪
2.移液器
3.离心机
4.匀浆器

1.PBS

1.96孔板
2.一次性手套

1.细胞裂解过程在冰上或室温操作均可，但以冰浴操作为佳，可以有效减少内源性蛋白酶等导致的酶活性下降。
2.组织匀浆过程在冰上或室温操作均可，但以冰浴操作为佳，可以有效减少内源性蛋白酶等导致的酶活性下降。
3.稀释后的G6PDH不太稳定，配制后宜尽快使用。

详细的步骤请查阅试剂盒里的纸质说明书。
试剂的配制：
1.G6PDH标准品的配制：
取4μl G6PDH (0.25U/μl，即250U/ml)和996μl G6PDH提取液混匀即为1U/ml G6PDH标准品。

2.G6PDH标准曲线的设置：
取200μl G6PDH标准品(1U/ml)用G6PDH提取液3倍系列稀释(serial dilution)成适当的浓度梯度，如初次检测可以设置0、1.37、4.1、12.3、37、111、333、1000mU/ml这几个浓度，检测时96孔板每孔加入50μl的标准品，相当于每孔加入的G6PDH的酶量为0、0.069、0.21、0.62、1.85、5.56、16.7、50mU。如有必要，在后续的实验中可以根据样品中的G6PDH活性对标准品的浓度范围进行适当调整。其中浓度为0mU/ml的标准品为空白对照 (Blank)，仅含G6PDH提取液。

3.G6PDH检测液的配制：
样品中的NADPH等可能会产生一定的背景，建议设置加入样品而不加入G6PDH底物的背景对照；
对于标准品和样品的G6PDH检测液，需要加入G6PDH底物。
每个背景对照、标准品或样品的检测需要使用50μl的G6PDH检测液，请根据所需检测的背景对照、标准品和样品的数量，配制适量的G6PDH检测液，并注意现配现用。

细胞样本：
贴壁细胞：
1.收集约1×10的6次方个细胞(大约相当于6孔板一个孔长满的细胞数量)，吸净培养液，用移液器加入200μl的冰浴预冷的G6PDH提取液，轻轻吹打混匀；
2.12,000g，4ºC离心5-10分钟，取上清待测，冰浴存放备用。

悬浮细胞：
1.收集约1×10的6次方个细胞，600g离心5分钟，吸净培养液，用移液器加入200μl冰浴预冷的G6PDH提取液，并轻轻吹打；
2.12,000g，4ºC离心5-10分钟，取上清待测，冰浴存放备用。

组织样本：
1.冰浴预冷的PBS洗涤组织后，称取约10-30mg的组织样品，用剪刀剪碎，置于匀浆器中，加入400μl的冰浴预冷的G6PDH提取液在冰上或室温进行匀浆。
2. 2,000g，4ºC离心5-10分钟，取上清待测，冰浴存放备用。

样品的测定：
略